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  • 胰岛素生物检定法
    来源:1399全球医药网  发布日期:2016-11-02  发布者:taoyn  共阅504次  字体:
    G. 胰岛素生物检定法
      本法系比较胰岛素标准品(S)与供试品(T)引起小鼠血糖下降的作用,以测定供试品的效价。
      标准品溶液的配制
      精密称取胰岛素标准品适量,按标示效价,加入每100ml中含有苯酚0.2g并用盐酸调节pH值为2.5的0.9%氯化钠溶液, 使溶解成每1ml中含20单位的溶液,分装于适宜的容器内,4~8℃贮存,如无沉淀析出,可在3个月内使用。
      标准品稀释液的配制
      试验当日,精密量取标准品溶液适量,按高低剂量组(ds<[2]>、ds<[1]>)加0.9%氯化钠溶液(pH2.5)配成两种浓度的稀释液,高低剂量的比值(r)不得大于1:0.5。高浓度稀释液一般可配成每1ml中含0.06~0.12单位,调节剂量使低剂量能引起血糖明显下降,高剂量不致引起血糖过度降低,高低剂量间引起的血糖下降有明显差别。
      供试品溶液与稀释液的配制
      按供试品的标示量或估计效价(A<[T]>),照标准品溶液与其稀释液的配制法配成高、低两种浓度的稀释液,其比值(r)应与标准品相等,供试品和标准品高低剂量所致的反应平均值应相近。
      检定法
      取健康无伤、同一来源、同一性别、出生日期相近的成年小鼠,体重相差不得超过3g,按体重随机分成4组,每组不少于10只,逐只编号, 各组小鼠分别自皮下注入一种浓度的标准品或供试品稀释液,每鼠0.2~0.3ml,但各鼠的注射体积(ml)应相等。注射后40分钟,按给药顺序分别自眼静脉丛采血,用适宜的方法,如葡萄糖氧化酶-过氧化酶法测定血糖值。第一次给药后间隔至少3小时,按双交叉设计,对每组的各鼠进行第二次给药,并测定给药后40分钟的血糖值。照生物检定统计法(附录Ⅹ
      Ⅳ)中量反应平行线测定双交叉设计法计算效价及实验误差。
      本法的可信限率(FL%)不得大于25%。
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